高效利用秸秆的香菇新菌株选育?
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香菇（Lentinus edode）是一种药食两用菌，香气浓郁，肉质细腻可口，不仅营养价值高，而且药用价值和经济价值也很好。由于香菇属于木腐型真菌，代料栽培时对阔叶林木屑的消耗量很大，栽培成本高已成为当前阻碍香菇产业发展的一个重要因素。生产上，香菇培养料配方数十年来一直沿用78∶20∶1∶1的常规配方，新配方研究鲜见报道1。由于香菇属于白腐菌种，可产生木质素降解酶，故可尝试利用秸秆培育香菇2，3。我国是农业生产大国，农作物秸秆资源非常丰富，但由于木质素含量较高，严重影响了秸秆的降解和再利用。本研究采用紫外线诱变与杂交育种相结合的育种手段，选育适合在玉米秸秆代料培养基上生长的香菇新菌株，并对其部分生物学特性进行研究，以期为秸秆的有效利用及降低香菇培育成本提供一条新途径。
1材料与方法
1.1试验材料
1.1.1菌株香菇 8号和香菇L26， 由绥化学院食用菌研究所提供。
1.1.2培养基分离孢子所用培养基：酵母膏 3 g，蛋白胨 2 g，KH2PO4 0.46 g，K2HPO4 1 g，MgSO4 0.5 g，葡萄糖 20 g，琼脂 20 g，蒸馏水 1 000 mL，pH自然。
平板综合培养基：马铃薯 200 g（去皮），蛋白胨 5 g，麸皮 50 g，KH2PO4 3 g，MgSO4 1.5 g，葡萄糖 20 g，VB1 20 mg，琼脂 20 g，蒸馏水 1 000 mL，pH 自然。
秸秆筛选培养基：木屑20%、玉米秸秆粉68%、麦麸10%、蔗糖1%，CaSO4 1%，pH自然。玉米秸秆粉的制备：将玉米秸秆经晾干、除杂、切段（每段长约3 cm）、烘干、粉碎等预处理后过40目筛。
1.1.3试验仪器bl-50A型立式压力蒸汽灭菌器（上海东亚压力容器制造有限公司）；SW-CJ-2F型超净工作台（苏州净化设备有限公司）；HPX-9162MBE型恒温培养箱（上海博迅实业有限公司医疗设备厂）；LRH-400-GSI型人工气候箱（韶关市泰宏医疗器械有限公司）。
1.2试验方法
1.2.1单核菌丝的获得出发菌株（种菇）的处理4：适当切去种菇部分菌柄，子实体剩余部分用 75%酒精消毒处理后，置于灭菌的孢子采集装置中收集孢子。
孢子的分离5：用无菌水将收集到的孢子反复稀释至浓度为106个/mL，吸取适量孢子液注入孢子分离培养基上，涂布均匀后置于25℃恒温培养箱培养，约8～9 d后萌发孢子丝。
孢子丝的诱变：孢子丝萌发后，移置 30 W 紫外灯正下方 30 cm 处进行诱变。照射时间共设5个处理：0.5、2 、4、6、8 min，每个处理重复3次。诱变后立即用黑布包好，置于25℃恒温培养箱中继续培养。
单核菌丝的鉴定6：暗培养4 d左右，挑取边缘菌丝用显微镜观察鉴定。若未出现锁状联合现象，即可认为是单核菌丝，然后将其转接至斜面培养基上进行培养。观察单核菌丝的生长状况，培养12～14 d后，淘汰长势不理想的菌丝体，保留长势好的单核菌丝体作为亲本菌株用于杂交试验。
1.2.2配对杂交将筛选所得菌丝特性较好的菌株，两两配对接种于装有平板综合培养基的培养皿中，彼此相距1.0～1.5 cm。待培养 10～15 d后菌丝体接触，挑取接触处的菌丝镜检，出现锁状联合现象的即可认为为双核菌丝，说明杂交成功，然后转接到斜面培养基上，25℃恒温培养。
1.2.3拮抗试验在平板综合培养基的中间接种有效的杂交菌丝体，其两侧分别接种两亲本菌丝体，距离为2～3 cm，培养1个月后观察拮抗现象。由于同种菌丝间能够融合生长，相交处不会出现拮抗线，故只有在杂交后代与亲本菌丝间同时显示有两条黄褐色拮抗线时，此杂交后代为真正的杂合体7，8。